脫酰胺反應(yīng)：在脫酰反應(yīng)中，Asn/Gln 殘基水解形成Asp/Glu。
非酶催化的脫酰胺反應(yīng)的進(jìn)行。 在Asn-Gly-結(jié)構(gòu)中的酰胺基團(tuán)更易水解，位于分子表面的酰胺基團(tuán)也比分子內(nèi)部的酰胺基團(tuán) 易水解。
氧化多肽溶液易氧化的主要原因有兩種
一是溶液中有過氧化物的污染，
二是多肽的自發(fā)氧化。
在所有的氨基酸殘基中，Met、Cys和His、Trp、Tyr等最易氧化。氧分壓、溫度和緩沖 溶液對氧化也都有影響。
水解：多肽中的肽鍵易水解斷裂。由Asp參與形成的肽鍵比其它肽鍵更易斷裂，尤其是 Asp-Pro和Asp-Gly 肽鍵。
形成錯誤的二硫鍵：二硫鍵之間或二硫鍵與巰基之間發(fā)生交換可形成錯誤的二硫鍵，導(dǎo)致三 級結(jié)構(gòu)改變和活性喪失。
消旋：除Gly外，所有氨基酸殘基的α碳原子都是手性的，易在堿催化下發(fā)生消旋反應(yīng)。其 中Asp殘基最易發(fā)生消旋反應(yīng)。
β-消除：β-消除是指氨基酸殘基中β碳原子上基團(tuán)的消除。Cys、Ser、Thr、Phe、Tyr 等 殘基都可通過β-消除降解。
在堿性PH下易發(fā)生β-消除，溫度和金屬離子對其也有影響。
變性、吸附、聚集或沉淀變性一般都與三級結(jié)構(gòu)以及二級結(jié)構(gòu)的破壞有關(guān)。在變性狀態(tài)，多 肽往往更易發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，活性難以恢復(fù)。在多肽變性過程中，首先形成中間體。通常中間 體的溶解度低，易于聚集，形成聚集體，進(jìn)而形成肉眼可見的沉淀。
提高多肽穩(wěn)定性建議
1）定點(diǎn)突變: 通過基因工程手段替換引起多肽不穩(wěn)定的殘基或引入能增加多肽穩(wěn)定性的殘基， 可提高多肽的穩(wěn)定性。
2）化學(xué)修飾: 多肽的化學(xué)修飾方法很多，研究最多的是PEG修飾。PEG是一種水溶性高分子化合 物，在體內(nèi)可降解，無毒。 PEG與多肽結(jié)合后能改善多肽的溶解性，可以進(jìn)行生物相容性調(diào)節(jié)， 提高熱穩(wěn)定性，抵抗蛋白酶的降解，降低抗原性，延長 體內(nèi)半衰期。 選擇合適的修飾方法和 控制修飾程度可體質(zhì)或提高原生物活性。
3）添加劑: 通過加入添加劑，如糖類、多元醇、明膠、氨基酸和某些鹽類，可以提高多肽的穩(wěn) 定性。糖和多元醇在低濃度下 迫使更多的 水分子圍繞在蛋白質(zhì)周圍，因而提高了多肽的穩(wěn)定 性。在凍干過程中，上述物質(zhì)還可以取代水而與多肽形成氫鍵來 穩(wěn)定多肽的天然構(gòu)象 ，而且 還可以提高凍干制品的玻璃化溫度?！〈送獗砻婊钚詣┤鏢DS、Tween、Pluronic,能防止多肽 表面 吸附、聚集和沉淀。
4）凍干: 多肽發(fā)生的一系列化學(xué)反應(yīng)如脫酰胺、β-消除、水解等都需要水參與，水還可以作 為其它反應(yīng)劑的流動相。另外，水含 量降低可使多肽的變性溫度升高。因此，凍干可提高多 肽的穩(wěn)定性
